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中国麇鹿朊蛋白核心片段的原核克隆表达与纯化
从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5'和3'端引入EcoR I和Hind Ⅲ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAATAA变成两个终止密码子.通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a(+),转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求.测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a(+),阳性质粒命名为MPrP-pET-32a(+),阳性质粒转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定.
Liu Yuliang
Liu Yufian
Hu Guoliang
Guo Xiaoquan
Sun Chengyou
作者单位:
中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032;江西农业大学,江西南昌,330013
中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛,266032
江西农业大学,江西南昌,330013
年,卷(期):
S852.659.7
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麋鹿朊蛋白全基因的克隆及序列分析南湖钓大青--《中国钓鱼》1998年12期
南湖钓大青
【摘要】:
【关键词】:
【分类号】:G897【正文快照】:
今年9月24日,天气晴间多云,偏北风2-3级,气温27℃。我用自己改制的6.3米带轮手竿、直径0.3毫米钓线和11号隼牌鱼钩,于上午8时45分钓着一条长1.29米、重25.7千克的大青鱼,经过3个多小时、几十个回合的较量,在两位钓友的帮助下才将其拖上岸。用手竿钓起这样大的鱼近
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