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(附加题)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：
(1)若已获取PG的mRNA，可通过_______获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是______。(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选，理由是______。之后，还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与_________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若________，则可确定转基因番茄培育成功。(4)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用_______________技术；其中，愈伤组织经______形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加____________。
题型：读图填空题难度：偏难来源：模拟题
(1)逆转录法&&& & 大量复制目的基因(或克隆目的基因)(2)卡那霉素&&& & 重组质粒中含卡那霉素抗性基因而四环素抗性基因被破坏&&&&&& 是否发生质壁分离(3)天然的PG基因转录的mRNA&&&&& 番茄果实的保质期延长(4)植物组织培养&& && 再分化(或细胞增殖和分化)&&&&&& 植物激素(生长调节剂、生长素和细胞分裂素)
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据魔方格专家权威分析，试题“(附加题)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番..”主要考查你对&&现代生物技术在育种上的应用，基因工程的基本操作程序，植物的组织培养技术&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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现代生物技术在育种上的应用基因工程的基本操作程序植物的组织培养技术
现代生物技术在育种上的应用：1、转基因技术育种：是指按照人们的意愿，把一种生物的某个基因克隆出来，加以修饰和改造，再转移到另一种生物的细胞里，从而定向地改造生物的遗传性状。包括目的基因的制备和目的基因导入受体细胞的过程。2、转基因植物的实例：转基因烟草、转基因耐贮藏番茄、转基因抗虫作物（抗虫棉、抗虫玉米、抗虫杨树和抗虫甘蓝）、抗除草剂作物。3、转基因动物的实例：超级小鼠、绵羊、兔等。4、细胞杂交育种：指将同类或不同类生物体地原生质体或体细胞，在一定的物理或化学条件下进行融合形成杂种细胞，再创造条件将杂种细胞培养成完整的杂种生物个体。（如马铃薯--番茄植株和白菜——甘蓝）基因工程的基本操作程序：1、目的基因的获取（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。2、基因表达载体的构建（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图：①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。（3）基因表达载体的构建过程：3、将目的基因导入受体细胞（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（2）常用的转化方法：
（3）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4、目的基因的检测和表达（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。 （4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。知识点拨：1、构建基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。 2、PCR技术：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基冈的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。目的：通过指数式扩增获取大量的目的基因。 3、基因文库中不是直接保管相应基因，基因文库中的基因保存在受体菌中。 4、在基因工程的四个操作步骤中，只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。5、原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，有利于目的基因的复制与表达，因此常用大肠杆菌等原核生物作为受俸细胞。 6、植物细胞的全能性较高，可经植物组织培养过程成为完整植物体，因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞；动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。7、转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中，从而使受体生物获得了新的遗传特性的现象，从其变化的实质看，这种变异属于可遗传变异中的基因重组。 知识拓展：1、基因文库的构建：（1）概念①基因组文库：含有一种生物的全部基因。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因组文库。 ②cDNA文库：只包含了一种生物的部分基因。 （2）构建过程
2、人工合成目的基因（1）反转录法：（2）人工合成目的基因3、PCR技术扩增目的基因①原理：DNA双链复制②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。植物组织培养技术：1、植物组织培养过程：（1）原理：植物细胞具有全能性。（2）过程：2、用途：(1)微型繁殖微型繁殖就是用于快速繁殖优良品神的植物组织培养技术，也叫快速繁殖技术。繁殖过程中的分裂方式是有丝分裂，亲、子代细胞内DNA不变，所以能够保证亲、子代遗传特性不变。 (2)作物脱毒作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织，进行微型繁殖，所获幼苗是无毒的。 (3)人工种子：通过组织培养技术，可把植物组织的细胞培养成在形态及生理上与天然种子胚相似的胚状体，也叫作体细胞胚。这种体细胞胚有于叶、根、茎分生组织的结构。科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构，使其具备种子机能。所以，人工种子是一种人工制造的代替天然种子的颗粒体，可以直接播种于田间。①制作方法：人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等，然后包上人丁种皮就形成了人工种子，如图：②优点：可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖；保持亲本的优良性状，因该过程为无性繁殖；节约粮食，减少种子的使用；可以控制添加一些物质，如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。 周期短，易储存和运输，不受气候和地域的限制。(4)细胞产物的工厂化生产：从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素、香料等。 &知识点拨：1、植物组织培养的注意事项：（1）接种时应注意的事项：①接种室要消毒；②无菌操作；③接种时要防止交叉污染；④接种完立刻盖好瓶口。（2）外植体接种前，需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒的操作：①接种前一天，将接种室的四个角落用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。②接种前1小时，在接种室内用喷雾器喷洒来苏水；桌椅也用来苏水擦拭；接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。③将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。④接种前，操作者用肥皂清洗双手，擦干，再用酒精棉球擦拭双手。⑤用次氯酸钠溶液将外植体消毒。2、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料。3、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。4、植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂5、植物组织培养过程中分化成的幼苗需要移栽，移栽时，应先将培养瓶的封口膜打开一段时间，让试管苗在培养间生长几日；移栽时需用流水清洗根部的培养基；最后幼苗需移植到消过毒的新环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。知识拓展：1、植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。(2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。2、作物新品种培育（1）单倍体育种：①过程：植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四种类型）；对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养）；得到单倍体植株；对其幼苗时期进行秋水仙素处理；得到了正常的纯合二倍体植株（AABB、Aabb、aaBB、aabb四种类型）。②优点：明显缩短育种年限（2）突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体）3、细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。4、植物组织培养的优点：①不受生长季节限制地繁殖植物。②不携带病毒。③培养周期短。④可用组培中的愈伤组织制取特殊的生化制品。⑤可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物。⑥可诱导之分化成需要的器官，如根和芽。⑦解决有些植物产种子少或无的难题。如将香蕉进行组培得到人工种以方便移种。5、培养基的制作：制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。肉汤培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养。制备MS固体培养基操作过程：配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍；激素类、维生索类以及用量较小的有机物一般可按1mg/mL的质量浓度单独配制成母液；将分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。6、消毒和灭菌：外植体可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培养基需用高压蒸汽灭菌。&
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　　本攻略需要：生化武器瘟疫，一台能玩PIE的机子，PIE游戏
　　本攻略简介：此方法可以在困难模式稳定5星，解药控制在20%以下，时间控制在350左右，本速推流完全无视化武的三个特殊能力，坚决贯彻落实以战养战的战略，好了，废话到此为止，上正文！
　　1，为你的瘟疫起个霸气的名字(我的可以无视)
　　2，选择基因序列
　　①高能量供给(ATP Boost)：激进流必备，开场占据一定有势
　　②海洋亲和性(Aquacyte)用于向岛国传播病原体(可以没有)
　　③病症专家(Sympto-Stasis)减少病症的额外DNA花费，激进流必备
　　④基因拟态(Genetic Mimic)抵消病症专家带来的负面影响(可以没有)
　　⑤极端微生物(Extremophile)让病原体的传播更方便(换成城市也可以，也可以没有)
　　3，开始时，先加囊肿(Cysts)，溃疡(Abscesses)，咳嗽(Coughing)，然后天朝开局
　　4，然后攒5个DNA点开恶心(Nausea)，呕吐(Vomiting)造成连击
　　5，继续攒，点开皮疹(Rash)，出汗(Sweating)，增强传染力
　　6，点出鸟类传播1级(Bird1)，鸟类传播2级(Bird2)增强陆地传染
　　7，现在，你的病原体大概已经在有几百万了，点开肺水肿(Pulmonary Oedema)，贫血(Anaemia)，开始对外扩张。现在，高调的我们大概已经被发现了，不过没事，人类是无法阻止我们的！
　　8，继续传染，这时大概会进入一个感染倦怠期，这个时期我们点1点抗药和一点抗热9，当病原体通过飞机传播到欧洲时，点出极度过敏(Hyper sensitivity)，喷嚏(Sneezing)和腹泻，开连击，增感染
　　10，继续攒DNA，点出二级抗药和一级抗寒，然后再点血友病(Heamophilia)和皮肤破损(Skin Lesions)出连击，增感染，然后点一点基因强化(Genetic Hardening)
　　11，这时，病原体应该已近大规模传播到非洲各国了，用大量的DNA进化出2级抗寒热和
　　环境强化(Environmental Hardening)，以及啮齿动物传播1级(Rodent1)家畜传播1级(Livestock1)
　　12，现在进入最终传播阶段，这时要注意病症的突变了，如果突变出高致死的病症就先退掉，防止岛国关闭港口，等到全球的国家都被感染后，点出坏死，如果DNA还很富足，就点老鼠和家畜吧
　　13，在感染全人类期间，如果解药研制超过25%，就进化癫狂(Insanity)和昏迷(Coma)来杀解药，基因重组太浪费DNA
　　14，最后，全人类感染后，祭出大杀器全身器官衰竭(Total Organ Failure)以及脑死，剩下的DNA基因重组吧
　　15，静候灭世
　　16，截图纪念
来源：游民星空
  17:56:18
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终身荣誉元老
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本帖最后由
22:44 编辑
& && &&&大家好！我是小米随着这次恶魔果实树的大更新，又有新果实和大家见面了！小米在这里也给大家献上一篇七星恶魔果实实用攻略！仅为个人观点，如有错误，大家拍轻点哦^_^
一、火箭果实
实用性：★ ★ ★ ★ ★
排名：第一名
20:59 上传
说明：火箭果实作为七星果实里面最贵的了！恶魔树第一名才有丫！不过毕竟物有所值！在+5的情况下，双鼓舞就可以怒气技能，土豪加10就更厉害了！搭配罗宾，鹰眼，路飞，青雉，这些伙伴，不论推图还是竞技场都是无往不利！当然他也有不适合的伙伴，比如甚平，但这样并不影响它成为当之无愧的第一名！
二、瘟疫果实
实用性：★ ★ ★ ★
排名：第二名
21:03 上传
说明：瘟疫果实作为本次推出的新果实！小米觉得都可以称为八星果实了，即使1级的情况下都有20%机率造成对方2名伙伴进入混乱状态，逆天丫！建议给主角使用！有机会逆袭大约10万战斗力存在！由于它还是带有一定的偶然性，所以排行第二！
三、雪怪果实
实用性：★ ★ ★ ★ ☆
排名：第三名
18:30 上传
说明：雪怪果实可以说是一个全伙伴果实减少伤害，不管主力还是鼓舞都可以使用！现在开启双果实情况下已经如此，以后开启三果实，几乎每个伙伴都要！可以完全增加一回合的生还率，一回合就等于对方全灭了！
四、巨蓝鲸果实
实用性：★ ★ ★ ★
排名：第四名
18:35 上传
说明：巨蓝的效果是杀死对方伙伴后回复自身百分比血量！所以这样的果实给主力最好比如甚平~但鼓舞用就完全是鸡肋！而且后期都是鹰眼秒杀，作用越来越小！在前中期效果还是很大的！
五、狮鹫果实
实用性：★ ★ ★ ★
排名：第五名
18:39 上传
说明：在物理流横行的时代狮鹫一度成为神果实，乌索普和甚平戴着一个普攻，鼓舞必死的说！但他最大的弱点就是只有一回合！如果打不死，效果几乎就等于没有了，所以在使用他的情况下，自己实力也必须厉害！现在必杀流时代，配合他必须要用火箭或知识果实3鼓舞，如果对付娜美破你一回合必杀，那么它就没有用了！所以它也只是一个前中期果实！
六、盾牌果实
实用性：★ ★ ★ ☆
排名：第六名
18:46 上传
说明：盾牌果实作为这次新推出的恶魔树第一名奖励果实！乍看下熟悉好厉害前两回合免疫必杀攻击，这不是对付火箭鹰眼路飞的利器吗？其实不然，这里的两回合是指携带果实的伙伴攻击2次后！这样盾牌就鸡肋了！想要发挥效果就必须不停换阵！所以这个果实最后的定义就是服霸打服霸用的！超v专属，我们就看看吧^_^
七、碎裂果实
实用性：★ ★ ★
排名：第七名
20:43 上传
说明：碎裂果实其实给乌尔基乌索普这类伙伴是不错的，效果一出接近双倍的伤害！打击横排！特别给力~但由于是物攻触发效果，怒气没用！所以实用性还是较低，千万别给了甚平这样的全屏伙伴，会后悔一辈子哒！总的来说给乌索普最好了，过了这个时期给不过果实的伙伴撑撑熟悉吧~主角嗯，不错~
八、蜘蛛果实
实用性：★ ★
排名：第八名
20:44 上传
说明：蜘蛛果实不管在前中后期表现都不大，造成对付伙伴晕眩一回合，好像很腻害~但靠人品来的，而且占用一个伙伴果实位置！何不去放更好的果实？所以蜘蛛真的好水！
九、催眠果实
实用性：★&&
排名：第九名
说明：每次开到催眠果实各位有没有大声喊坑丫！反正每次论坛都爆这个，作为七星果实效果确如此之差造成150%伤害听起来好厉害！但怒气技能没用丫！普通攻击别人甚平一次5个人触发效果变1个人！乌索普会用这果实吗？物理流恐怕没人用吧！万年的仓库养眼货(我也有个七星哦)！
十、三叶虫果实
排名：第十名
说明：三叶虫，我给了你实用性0的评分！毫无用处在减少生命后减少对付给予的伤害，按照计算减少100%伤害才少20%伤害？在秒杀流的现在？何用处？连鸡肋都排不上号了！所以去仓库吧~都不敢拿出来和别人说自己开了三叶虫！
& && &&&好了，本期攻略就到这里！请大家拍转~谢谢在编辑中等待的友友们的支持~鞠躬！
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终身荣誉元老
&编辑中&_&明天才出&
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酱油瓶太大。。待到明天好了
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为啥给屏蔽了？
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苹果平台下载瘟疫公司朊病毒终极困难模式攻略，从插入基因开始说，详细一点_百度知道
瘟疫公司朊病毒终极困难模式攻略，从插入基因开始说，详细一点
之後点鸟媒，出完之後死亡附加DNA暴增，日本永远死得早开局在沙特可以冒险升一下症状胃1，这时等蓝飞机就行了我是英文版的，我也不知具体怎麼翻译选择基因蓝瓶加DNA，飞机空中感染，取消解链所付出的DNA，点呼吸系统到心脏（这得等会儿才有效，之後点点其他症状吧，之後在传播途径主要留意任何提示变异的信息，一变趁著暂停立刻退掉沙特以风媒和水媒以及血液传播，但因为抗药和特技你等得起）。点了上面的之後就等吧，随时推掉症状，升满抗药，强化和基因到了完全传播（一定要完全到给你提示）后把所有刚才点的传播途径，火强化冰强化都卖掉，抗药和特技千万别动，血液（右下的症状）点到出大波浪（一个是细胞，另一个是大脑），但很明显基因根本不够，冰1必须点，非洲以及中东飞速传播，但适可而止是必须的，或者直接点热1传播有闲钱就点冰2，到了南半球差不多时点鸟1杀俄罗斯，中国的话慢，但主攻风媒和蚊媒干死俄罗斯和西亚，强化1，病毒加强更难消灭，平衡加强一切生存力在中国或者沙特开局开局把三个特殊点了，之後开抗药1
虽然发了以后回头就赢了，忘了来采纳，还是要谢谢，遂人我不是这么玩得
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