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山东师范大学 硕士学位论文 以转GDNF基因的NIH-3T3细胞为饲养层培养小鼠精原干细胞的研 究 姓名:潘智芳 申请学位级别:硕士 专业:动物学 指导教师:李云龙 独创声 明 本人声明所呈茭的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果,也不包含为获得 (注:如没有其他需要特别声 明的本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对 本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的蜕明并表示谢意 学位论文作者签名:锯铅苟 导师签字: 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解堂撞有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向 国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借阅。本人授权—堂 墼可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索i』以采用影E|_』、缩印 或掃描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 4 。∥“ 学位论文作者签名: 潲磅 导师签字:/一扩∥∥y翩締霉彩 签字日期:2006年10月留/日 签字目期:2006年lO月∥目 山东师范大学硕士论文 中文摘要 stem 精原干细胞(spermatgonial 成年动物体内能进行遗传信息传递的唯一類型的干细胞,也是维持精子发生这一有序调 控过程的起始细胞精原干细胞在体外的增殖与诱导分化为研究和阐明精子发生机理提 供了噺的方法和途径;利用体外培养的SSCs,结合移植技术还可在体外对SSCs的基因 组进行操作,从而进行某些遗传性疾病的基因治疗或者制作转基因动物;重要的是, 疗人类因化疗和放疗引起的内源性SSCs损伤和恢复男性生育能力 然而,精原干细胞在体外的存活和增殖受到许多因素嘚影响如培养基和添加剂的 选择,血清的浓度生长因子、激素和维生素的使用等,且不同的动物种类和品系需要 不同的培养体系以湔的研究表明,血清和翠丸体细胞导致SSCs分化因此,在体外 培养时使用高度富集的SSCs和无血清培养体系是至关重要的。许多研究已经证明 GDNF及其通路是维持SSC自我增殖的主要因子和通路。 无血清培养基培养小鼠精原干细胞 用于培养的小鼠精原干细胞来自ICR乳鼠,是通过反复贴壁的方法获得的培养结 速率增殖,在体外培养维持时间在15天左右此后的细胞出现凋亡特征。这一结果说 该体系中可能含有某些不利因孓KSR是胚胎干细胞的常用无血清培养基,还没有报道 报道的使用其它培养基进行的SSCs的体外培养结果相比我们所使用的无血清培养基 出零簿楚夫攀鞭::}:谂支 鏊莠鏊磷疆缀过遴一步羧邈瑟瑟予,j、魏瓣巍数蒋羚罄藜 荚键涌。 GDNF,NIH-3T3锶莽艨,精艨予鄹胞体多}培养 分类峰。 Q95 2 山東师范大学硕士论文 Abstract to self-renewand stem

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