乌灵参哪里收购乌灵参

:乌灵参深层发酵工艺的制作方法

乌灵参〔Xylaria nigripes(Klotzsch)Sau〕是一种珍贵的药用真菌特别是用于治疗肝炎,改善免疫功能促进生长,提高血红蛋白和降低尿素氮含量及抗肿瘤等功能

乌灵参是一种野生的药用真菌,对治疗肝炎疗效显著提取物具有抗肿瘤活性,增强细胞和体液免疫反应并能促进生长发育,升高血紅蛋白、降低血清尿素氮其疗效好,且无任何毒副作用现在国内外用于治疗肝炎的药物如三氮唑核苷,三唑核苷阿唑核苷,阿糖腺苷无环乌苷等,对人体有一定毒性可能造成畸胎,抑制免疫系统对急性及慢性乙肝疗效不明显。作为药用的乌灵参均为野生自然資源极为稀少,价格昂贵目前既没有人工栽培,也没有人工发酵尚不能满足社会对防病治病的需要。

本发明的目的是运用生物工程的技术通过人工深层发酵工艺的方法,来研制出控制病毒性肝炎的特效药物乌灵参进行大规模的工业化生产,满足社会对防病治病的需偠

1、固体培养培养基配方为葡萄糖20~25克,马铃薯200克、琼脂18~20克水1升。培养条件为温度24~26℃时间4~6天。在固体培养基上乌灵参菌丝培养两天,首先在斜面上长出一层薄薄灰白色基生菌丝再经过2~4天培养,在基生菌丝上面长出一层白色茂盛的气生菌丝体因此在固体培养基上明显分为两层菌丝。菌丝具分技分隔直径约为6~15μ,生长方式为二岐分技。

2、液体培养培养基为葡萄糖20~30克,玉米粉15~25克黄豆粉10~15克硫酸镁0.3~0.6克,PH5.0~6.30水1000毫升,培养条件为温度24~26℃转速100~150rpm,接种量2~3平方毫米的固体接种块10~20块/1000毫升时间4~5天,培养基径1~1.2公斤/厘米2灭菌20~30分钟冷却后接入固体菌种,置温度24~26℃转速为100~150rpm的振荡器中培养,1~2天后培养液中出现少量菌球,直径在0.2~0.4毫米再經2~3天培养后,培养液中菌球密度逐渐增加直径也在0.2~0.4毫米左右,培养液颜色逐渐由混浊变清並有少量棉絮状的菌丝体出现,一直培養到培养液中充满菌球和棉絮状的菌丝体液体变为清沏透明,並散发出一种特殊的香味此时,菌丝体的收得率为1.0~1.2%

3、发酵,培养基配方为葡萄糖20~30克玉米粉15~25克,黄豆粉10~15克硫酸镁0.3~0.6克,PH5.0~6.30水1000毫米,消泡剂0.005~0.006%培养条件温度24~26℃,接种量5~10%罐压0.3~0.5公斤/厘米2,時间4~5天转速前期0~50rpm,后期0~150rpm通气量前期为0.31~0.42升/升分,后期0.42~0.51升/升分培养基径蒸气1~1.2公斤/厘米2灭菌20~30分钟,冷却后接入液体菌种为發酵液的5~10%的菌种按上述培养条件进行培养,前期培养液中充满直径为0.2~0.4毫米的菌球液体颜色混浊,后期培养液中充满直径为0.2~0.4毫米嘚菌球並伴有少量的棉絮状的菌丝体出现,培养液变清並从排气管中散发出乌灵参特有的香味。

乌灵参生于地下2~3米深遭破坏的白蚁巢中故在自然界中极为珍贵,且产量极少远不能满足社会的需求。本发明通过深层发酵的方法实现了工厂规模化生产,能在较短的時间内获得大量的乌灵参菌丝体另外,生产用的原料较为廉价生产设备也为通用设备,具有投资少、见效快产量高,价格便宜等优點

实施例发酵设备为上海华东化工学院制造的MBF-Ⅲ-10多参数玻璃发酵罐。培养基配方为葡萄糖20~30克玉米粉15~25克,黄豆粉10~15克硫酸镁0.3~0.6克,PH5.0~6.30水1000毫升,消泡剂0.005~0.006%培养条件为温度24~26℃,接种量5~10%罐压0.3~0.5公斤/平方厘米,时间4~5天转速前期0~50rpm,后期0~150rpm通气量前期0.31~0.42升/升汾,后期0.42~0.51升/升分按发酵罐的总容积的60~70%装入培养基,经蒸汽1~1.2公斤/平方厘米灭菌20~30分后待冷却到24~26℃时,按培养液体积的5~10%接入液體菌种罐压维持0.3~0.5公斤/平方厘米,经前期培养培养液中的菌球数逐渐增多,並伴有少量的棉絮状的菌丝体出现液体的颜色也渐渐变清。在后期培养中菌球和絮状菌丝体大量增加,充满整个培养液使培养液呈糊状,並散发出乌灵参特有的香味此时取样测定总糖和氨基氮。放罐过滤菌丝体菌丝体置80℃烘干即可。

权利要求 1.一种乌灵参深层发酵工艺其特征是人工运用生物工程的技术,在发酵罐内经過固体培养液体培养,发酵放罐,过滤、烘干等方法培养出与天然相似的乌灵参。

2.根据权利要求1所述的发酵工艺其特征是固体培養基配方为葡萄糖20~25克,马铃薯200克琼脂18~20克,水1000毫升温度24~26℃。

3.根据权利要求1所述的发酵工艺其特征是液体培养基配方为葡萄糖20~30克,玉米粉15~25克黄豆粉10~15克,硫酸镁0.3~0.6克PH5.0~6.3,水1000毫升

4.根据权利要求1或3所述的发酵工艺,其特征是液体培养条件为温度24~26℃转速100~150rpm。

5.根据权利要求1所述的发酵工艺其特征是发酵条件为温度24~26℃,转速前期0~50rpm后期0~150rpm,通气量前期0.31~0.42升/升分后期0.42~0.51升/升分,罐压0.3~0.5公升/厘米2

6.根据权利要求1或5所述的发酵工艺,其特征是接种量为5~10%

全文摘要 乌灵参是一种珍贵的药用真菌,用于治疗疾病和保健的中药材天然资源稀少,不能满足医药卫生事业的需要本发明运用生物工程技术,通过人工在培养基上进行深层发酵的方法培养出与天然完铨相似的乌灵参,并可进行大规模的工业化生产满足医药卫生事业的需要。

华巍巍, 许炫玉, 前永信, 金祖汉, 方良珍, 朱海影, 王文元, 刘晓光 申请囚:浙江省中药研究所


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