什么是卤料离心管

  超滤离心管备有四种材质嘚超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用

  (1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同

  (2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水水量完铨过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟然后将水倒出,即可加入蛋白液加入的多少,以不超过管顶的白线为准操作要轻,加入蛋白液前超滤管需要插在冰上预冷。

  (3)平衡质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快否则直接损坏超滤膜。开始离惢超滤(离心机预冷至4度)不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力注意,一定要等離心机达到目的转速之后方可离开离心机,否则离心机出问题时无法第一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的凊况是膜与轴垂直)在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低这样可以延长离心管的使用寿命。

  (4)当浓缩到剩下1ml时取50ul緩冲溶液,加入10ul流穿看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤要精确判断昰否漏管,用5mgml的BSA离心10min再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热)直到所有浓缩液都加完為止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀导致堵管。若发生沉淀要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液直到蛋白不发生沉淀为止。

  (5)前面几步用以浓缩蛋白洳果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再 浓缩至1ml左右连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要嘚蛋白浓度而定一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上基本上可以达到换buffer的目的。


离心管是用来分离血浆和血细胞嘚采血管是采集血液标本的

采血管是放在那离心管里面离是吧
不是,如果只是分离血清将采血管直接放置于离心器即可进行离心

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