您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
环介导等温扩增技术快速检测环境水体中沙门菌的研究.pdf65页
本文档一共被下载：
次 ,您可免费全文在线阅读后下载本文档
文档加载中...广告还剩秒
需要金币：300 &&
你可能关注的文档：
··········
··········
论文题目孥垒量蔓量主亡萱±醚迭遥控测叠境盔生生渔萱
答辩蚕员会主席:
塑.睦熟直级』捏虹
答辩娈员会成员:
坌越凹商堡』捏匝
直翅副熬攫
论义答辩日列:
:』:堑温州医学院砸学位论立
第一章引言
立题的背景和意义沙茵简介..
环境样品中沙门氏菌的快速检测方法
环介导等温扩增技术简介研冗内容
第章材料与方法试验材料?
试验方法“物及主要操作
检测条件优化.沙门菌的灵敏度检测.
扩增产物的分析
第三章方法结果与讨论
基固组提取效果分析啦州医学院碗。学Ⅱ论

反应条件的优化
.沙菌的灵敏度检测结果
第四章技术在温瑞塘河水体沙门菌检测中的应用
温瑞塘河研冤区概况?
温瑞塘河水样基因组的提取
.温瑞塘河水体沙门氏菌的检测方法比较
.温瑞塘河水体沙门氏菌定性研究
温瑞塘河沙门氏菌半定量检测研究
第五章讨论.环境水体中基因组的提取
温瑞塘河沙门氏茵检测点的选取检测方法与其他检测方法的比较
反应程序的优化
方法检测沙门菌方法的评价.检测体系的污染因素及防治措施
第六章结论
参考文献附录致谢温州Ⅸ学院碗学位论立
综述学位论文独创性声明
关于学位论文使用授权声明州Ⅸ学‰顺。学位论史
环介导等温扩增技术快速检测环境
水体中沙门菌的研究
沙门氏茼,是种普遍存在于自然界中的人曾共患病菌。它
广泛分如十受污染的水体中,此致病菌对人类和动物健康有极大的危害。就评价
受污染水质在流行病学上的安全度而言.沙门氏菌研究县有重要价值,因此加强
被污染水体中沙门氏菌的控制与检查,成为饮水安全和公共卫生等方面亟待解决
的币要问题。传统经地方法检测水中的沙门氏菌,需经过增苗、分离培养、生化
指标检验、血清学凝集反应
正在加载中，请稍后...503 Service Temporarily Unavailable
503 Service Temporarily Unavailable
nginx/1.4.1福建省首次检出14个沙门菌血清型
沙门菌是一种与人类关系极为密切的重要肠道病原菌,常引起感染性腹泻和食物中毒。该菌广泛存在于温血动物、冷血动物及外环境中。2001年1月,WHO组建了全球食源性感染性疾病监测网络(WHOGSS),2005年,中国疾控中心与美国疾控中心及WHO GFN合作,在中国建立沙门菌腹泻监测系统,福建省是中国沙门菌监测点之一,开展沙门菌血清型别的调查是沙门菌监测的一项重要内容。年我们在福建省沙门菌监测工作中,从腹泻病人、服务行业人员粪便标本、鱼粉饲料和海鱼样品中首次检出14个血清型(变种),结果报道如下。1材料与方法1.1菌株来源14个血清型(变种)中,4个由服务行业人员体检中检出,编号:01、个由腹泻病人粪便或发热病人血液中检出,编号:、、10173;另2个分别由鱼粉饲...&
(本文共2页)
权威出处：
沙门氏菌是一种最常见的人兽共患性病后,再用SF或SC增菌。上述增菌液分离培养原菌,常引起人类肠道感染及食物中毒;沙门于DHL或SS琼脂平板,挑取可疑菌落接种于氏菌广泛存在于温血动物,冷血动物及外环克氏双糖铁（KIA）、赖氨酸动力琼脂（LMA）境中,常引起动物致病;沙门氏菌容易污染食及甘露醇和ONPG培养基上,其反应符合沙品及饲料等,所以被列为进出境动物及动物门氏菌,继而进行培养性状,系统生化反应,产品法定的检疫项目。1987年以来,我们在开噬菌体裂解试验及血清学试验,按Kauff-展人、动物、饲料及环境等沙门氏菌调查工作mann-White沙门氏菌属抗原表（1988）判定菌中,检出并发现福建省尚未报道31个血清型型或血清型。生化反应及噬菌体裂解试验按（变种）沙门氏菌,其分布于3个DNA同源群,文献“·”‘’进行。血清学试验采用玻片凝集法,14个抗原群（亚群）,其中6个血清型（变个别菌株加试管凝集试验,诊断血清（59种及种）为国内...&
(本文共4页)
权威出处：
1999年以来 ,我们在福州市公共场所从业人员健康带菌者调查、患腹泻病的熊猫粪便及某饲料厂鱼粉沙门菌监测中 ,先后检出福建省尚未报道的 6种沙门菌血清型 ,该 6种血清型全国也罕见报道。1　材料与方法1 1　菌株来源　 4株菌分离自公共场所从业人员健康带菌者粪便〔菌号 :9916 7(Ａ )、992 14 (Ｂ)、2 0 0 0 4 0 (Ｃ)、2 0 0 183(Ｄ)〕 ;另 2株菌〔菌号 :992 4 4 (Ｅ)、2 0 0 0 76 (Ｆ)〕分别检自福州市西湖动物园一只腹泻病的熊猫粪便及马尾区某饲料厂鱼粉。1 2　分离与鉴定　人及动物取粪便或肛拭子经ＳＣ增菌液增菌 ;鱼粉饲料经缓冲蛋白胨水预增菌 18- 2 4ｈ后 ,再用ＳＣ增菌。上述增菌液分离培养于ＳＳ或ＤＨＬ琼脂平板 ,挑取 3类可疑菌落同时接种于克氏双糖铁、赖氨酸 -动力琼脂、甘露醇及ＯＮＰＧ四管培养管内 (“四管五项法”) 〔1〕,其反应符合沙门菌 ,继而进行培养...&
(本文共1页)
权威出处：
沙门菌是一种重要且常见的肠道病原菌 ,与预防医学、临床医学、兽医学、环境卫生、食品卫生、口岸检疫及对外贸易关系密切。沙门菌血清型别众多 ,掌握与分析其血清型分布特征及与人类疾病的关系 ,对防治沙门菌病有重要意义。我们于 1 975年起对沙门菌进行了较为系统和全面的监测 ,现整理分析如下。1材料和方法1
1调查方法 1 975—2 0 0 3年 ,在全省 9个设区市的50多个县 (市、区 )卫生防疫站和部分医疗单位、动植物检疫部门等 ,以点、面相结合 ,有计划和日常业务工作相结合的方式 ,开展人、动物、食品和污水等外环境的沙门菌调查。1
2菌株分离、鉴定及血清学分型按常规方法进行菌株鉴定与血清学分型 ,由省卫生防疫站最后完成。国内首次检出的血清型均经中国药品生物制品检定所国家专业实验室复核和确认。2　结果2
1血清群(亚群 )和血清型 (变种 )分布 2 8年在全省各类标本中 ,检出 3 1 2 0株沙门菌 ,分属于 2 0...&
(本文共4页)
权威出处：
沙门菌是人类最常见的肠道致病菌之一,也是重要的食源性致病菌之一,它可以引起伤寒、副伤寒等肠热症、败血症、急性肠炎等疾病并可引发食物中毒、疫情等公共卫生事件。国际上,许多国家都将沙门菌列为食品中病原菌监测菌之一,并建立起分子分型电子网络监测体系对其进行跟踪监测。沙门菌的抗原结构复杂多样,目前已超过2579种血清型[1],我国大陆约有300种,并且不断有新菌型的出现。从2002年-2011年10年间,我们对广州海珠地区健康人群进行沙门菌带菌情况调查及血清型分型研究,共采集486087份肛拭标本,检出沙门菌2596株,检出率为5.3‰。在检出的沙门菌中,罕见血清型有11种17株,其中国内首次检出的有4种,并获得中国医学细菌保藏管理中心颁发的菌株证书。现将研究情况报告如下。1材料与方法1.1标本及来源广州海珠地区2002年-2011年从业人员健康体检者肛拭标本。1.2培养基亚硒酸半胱氨酸增菌液购自中国腹泻病控制上海试剂供应研究中心;SS...&
(本文共4页)
权威出处：
198,年自生物药材蜂窝检出1株省内未发现的沙门氏菌,现将分离及鉴定结果报告如下. 一、分离培养药材蜂窝研碎用碑酸缓冲液稀释经胆盐乳精肉汤预增后用sF增菌,于SS,HE琼脂平板分离培养,挑其可疑菌落接种KIA和LMA上,其反应疑为沙门氏菌,继以进行生化及血清学试验。 二、培养与生化性状本菌为革兰氏阴性、无芽胞具有动力的短杆菌。在营养肉汤中呈均匀混浊生长,在普通营养肉汤琼脂上生长良好,菌落呈圆边缘整齐、光滑、湿润,2一2.smm大小。该菌分解葡萄搪产酸产气,还原硝酸盐成亚硝酸盐,氧化醉阴性,不分解乳糖、蔗楷、水杨普、侧金盏花醉,棉子精,分解麦芽精、甘露醉、阿拉伯籍、卫矛醉...&
(本文共2页)
权威出处：
扩展阅读：
CNKI手机学问
有学问，才够权威！
出版：《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
互联网出版许可证 新出网证(京)字008号
京ICP证040431号
服务咨询：400-810--9993
订购咨询：400-819-9993
传真：010-
京公网安备75号健康人的血液是无菌的，当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时，血液中可出现细菌，依程度不同分为菌血症、败血症或毒血症。当细菌侵入骨髓可引起严重的骨髓炎。尽早确立诊断是良好预后的关键，而把握送检指征是
内容载入中...
健康人的血液是无菌的，当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时，血液中可出现细菌，依程度不同分为菌血症、败血症或毒血症。当细菌侵入骨髓可引起严重的骨髓炎。尽早确立诊断是良好预后的关键，而把握送检指征是早期诊断的最好保证。
一、[送检指征]
1.症状指征：发热；皮疹；肝脾肿大；关节疼痛；神志昏迷或休克
2.疾病指征：化脓性病灶或损害；粘膜损伤性疾病；肝脏疾病；糖尿病；血液疾病及恶性肿瘤；艾滋病；呼吸道感染或呼吸衰竭；长期输液或导管介入疾病；血液透析患者；
3.重症监护病房患者的血流易感性：重症监护病房是医院内各科危重患者集中的病区，ICU病房肺炎的发生率高达30%以上，泌尿系感染高达20%以上，脏器功能衰竭约占50%，死亡率可达23.6%。这些患者的免疫力重度下降，任何部位的局部感染都将导致血流的播散，因此对于ICU病区患者及时的血液培养是降低ICU死亡率的有效途径。
4.骨髓培养：骨髓培养和血液培养的送检指征是基本一致的，但由于抽取骨髓不易被患者接受，且操作手续较血液繁琐，所以常规血液感染有指征时以抽取血液培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血液培养。
二、[标本采集]
1、采集时间
(1).一般原则：一般情况下应在病人发热初期或发热高峰期时采血。原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已用药而病情不允许停药的患者，也应在下次用药前采集。细菌的分离阳性率与采集的频率和部位有一定的相关性，在成人中，菌血症时非常低的，因此增加采样的频率和改变由一个部位采样而变为多部位采样，将会提高血液培养的阳性率。
(2).布鲁杆菌感染：最易获得阳性培养的是发热期的血液或骨髓。除发热期采血外，还可多次采血，一般为24小时抽3---4次。
(3).沙门菌感染：根据病程和病情可在不同的时间采集标本。肠热症患者在病程第1&2周内采集血液，或在1&3周内采集骨髓时最佳时间。
(4).亚急性心内膜炎：除在发热期采血外，应多次采血。第一天作三次培养，如果24小时培养阴性，应继续抽血3份或更多次进行培养。
(5).急性心内膜炎：治疗前1&2小时内分别在3个不同部位抽血样，分别进行培养。
(6).急性败血症：脑膜炎，骨髓炎，关节炎，急性未处理的细菌性肺炎和肾盂肾炎除在发热期采血外，应在治疗前短时间内与身体不同部位采血，分别作需氧和厌氧血液培养。
(7).不明原因发热：可于发热周期内多次采血作培养。如果24小时培养结果为阴性，应继续采血2&3份或更多次血样本作培养。
(8).肺炎链球菌感染：最佳时机是在寒战，高热或休克时，此时采集的样本阳性率较高。
2、标本采集
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，临床操作采血及将血液注入血瓶时应严格执行无菌操作程序。
（1）.成人采血容量以每瓶8~10ml为宜。儿童和婴幼儿分别采样3~5ml和1~2ml不等，但必须使用相应的儿童培养瓶为好。血液样本与培养基比例以1：10为宜，骨髓采集量一般为1~2ml。标本量越大，检出率越高，但抽血量过大时，容易出现假阳性。
[报告方式]
1.血液及骨髓培养应建立三级报告制度。
1第一级报告：当疑有细菌生长时，应以无菌操作挑取培养液作涂片，革兰染色镜检。镜检一旦见有细菌生长，并可排除污染细菌时，应立即转种培养瓶内培养物于血琼脂平板、中国蓝平板或巧克力平析培养。同时取血液混悬液根据涂片所见选药直接做K-B法药敏试验。并将镜检结果报告临床医生，与临床勾通并做好记录。
2第二级报告：测量直接药敏结果，同时根据培养出的菌落涂片情况、进一步确定细菌的类型，并将结果立即通知临床医生并做好登记。
3第三级报告：将分离出的细菌进一步作鉴定和正式的药敏试验，复合初步报告所得结果为最终结果。报告&培养出&&&菌&。
2.若培养7天仍无细菌生长者，报告无菌生长。
4.临床诊断为亚急性细菌性心内膜炎者，可继续培养至2周再发出阴性报告（自动血培养仪可在7天作出阴性报告）。
[临床意义]
现代临床医学的发展，光谱、超广谱抗生素的广泛使用，使耐药菌株增加，院内感染率上升，血液培养中分离出各种微生物种类显著增多，以前认为致病、条件致病或非致病菌的界限现在已不再如此绝对区分。厌氧菌感染菌血症占菌血症的5%--15%，有6%--15%的菌血症患者是混合菌感染，长期使用抗菌药物患者常常出现L型细菌，免疫力低下患者常发生真菌血症。因此对于每一种从血液培养分离出的细菌有必要重新认识它的临床意义。
（一）葡萄球菌
葡萄球菌属于微球菌科，自1989年至今已知葡萄球菌属包括28个种，其中有14个种可从人类临床标本中分离到。以血浆凝固酶作为分离标准可将其分为二大类：
1.金黄色葡萄球菌是引起人类感染的最主要的葡萄球菌，占葡萄球菌菌血症的90%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌或耐苯唑青霉素的金黄色葡萄球菌（MRSA）常呈多重耐药，即使有最有效的万古霉素治疗，其死亡率仍可达10%--30%，甚至可达50%。葡萄球菌还可引起中毒性休克。
2.凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）关于CNS的致病性问题争论很多，以前认为从血液培养中分离出凝固酶阴性的葡萄球菌大多是污染菌，但实际上在葡萄球菌菌血症的患者中有10%是由于凝固酶阴性葡萄球菌所致。这些患者大多数时患有先天性疾病的抵抗力低下者或是应用化学治疗剂、类固醇制剂、放射治疗而引起机体防御功能低下者。凝固酶阴性的葡萄球菌目前已成为心内膜炎的主要致病菌，尤其随着心脏外科手术的进展，由本菌引起的心内膜炎有上升的趋势。其耐药性比凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌更高，特别是耐苯唑青霉素的凝固酶阴性的葡萄球菌（MRCNS）其耐药性更高，常造成临床治疗上的困难。
据文献资料报道，凝固酶阴性的葡萄球菌败血症死亡率为14%。
（二）链球菌
1.A群链球菌是引起化脓性感染的主要菌种，致病力强，也是引起败血症的主要菌株之一。
2.B群链球菌又称无乳链球菌，近十多年来由该菌引起的新生儿败血症不断上升，其原因可能是由于妇女阴道中的B群链球菌带菌率高，从而使新生儿在产道感染B群链球菌的机会增加。
3.草绿色链球菌是亚急性细菌性心内膜炎的主要致病菌。此类链球菌常定居在扁桃体、鼻咽部或牙龈中，可发生局部病灶性感染。在拔牙或切除扁桃体时细菌侵入血流，如心脏有病变，细菌停留在损伤部位，并开始增殖而引起亚急性细菌性心内膜炎。
4.肺炎链球菌是人体口腔、鼻咽部的正常菌群，并不会引起疾病。当机体抵抗力下降时，可引起大叶性肺炎、支气管肺炎，如处理不当可导致血流播散，而导致败血症。
（三）肠球菌是医院内感染中常见病原菌之一。引起人类感染的主要是粪肠球菌，其次是屎肠球菌和鸟肠球菌，为近年来急性心内膜炎的病原菌之一。肠球菌对抗菌药物耐药性很高，特别是庆大霉素高耐药株。如药敏报告提示是高耐庆大霉素肠球菌，即提示青霉素类抗菌药物不能与氨基糖苷类抗菌药物联合用药。万古霉素是高耐肠球菌的首选药物。肠球菌败血症平均死亡率可达25%。
（四）革兰阴性杆菌　在常规血液培养中革兰阴性杆菌引起的菌血症约占71.4%，所分离菌种类与局部感染病灶有关，败血症的平均死亡率为25%。常见的感染菌有：沙门菌、大肠杆菌、气单胞菌、布鲁菌、沙雷菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞、流感嗜血杆菌等。
（五）真菌　真菌血症常发生于重症疾病的晚期，特别是应用广谱抗生素和皮质激素后，如白血病、粒细胞减少症、再生障碍性贫血、癌症、结核和艾滋病人。由于机体免疫功能低下，在原发病灶加重的同时，常发生继发感染及二重感染。任何部位，尤其是正中静脉插入或留置导管均可引起真菌感染。所分离出的病原真菌以白色假丝酵母菌为主。
[注意事项]
1．一般应在抗菌药物使用前采集血液标本。　　
2.严格作好采血部位及血培养瓶瓶塞的消毒，严格要求无菌操作，防止污染。
3.如用BacT/Alert血液分析系统时，不能用碘酒消毒瓶盖，只需75%酒精消毒瓶盖。
4.成人血液培养瓶每瓶接种不超过12ml，儿童不超过7ml，新生儿不超过5ml，血量过大可能出现假阳性。
5.注入标本后的血培养瓶应立即送往细菌室，最迟不超过2小时。如因某种原因不能立即送检时，应将已经接种样本的培养瓶放在室温，切勿放冰箱存放，防止细菌死亡。
6.严格防止标本次序混乱，按一人一瓶一单原则，每作一患者培养立即将化验单边条贴在培养瓶上或将可撕条码贴在相应化验单上，严禁多个患者同时采样，流水操作的工作作风，因为采样错误将会导致医生错误诊断，甚至危及病人的生命。
7.同时作厌氧培养和需氧培养时，应先将降标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。
8.采集标本用的针头、注射器及废弃培养瓶必须经高压灭菌后才能丢弃，因为菌血症患者血标本中的微生物可成为传染源。
9.采用后的血培养瓶在送往细菌室的过程中，如天气寒冷应采取一定的保暖措施。
10.应在化验单上标明准确采样时间。&
<input type="hidden" name="content" value=" " />
更多相关【】的文章
期待你精彩评论，请勿灌水！
请自觉遵守互联网相关政策法规
检验资讯栏目列表
全站资讯搜索