脐带血干细胞及脐带间充质干细胞对失代偿期肝炎后肝硬化患者肝脏功能恢复的研究--《河北北方学院》2013年硕士论文
脐带血干细胞及脐带间充质干细胞对失代偿期肝炎后肝硬化患者肝脏功能恢复的研究
【摘要】：近年来,患者自体骨髓干细胞移植在肝硬化治疗中的良好效果已经得到认可,但该治疗方法存在诸多限制,比如：采集过程痛苦,数量不足,分化能力不足等。体内外实验提示脐血干细胞及脐带间充质干细胞在自我更新,增殖分化和扩增潜能方面均优于骨髓干细胞。本研究的目的是建立分离脐血干细胞及脐带间充质干细胞分离培养的方法,并观察两者植入对失代偿期肝炎后肝硬化的临床效果,以寻求一种安全、有效的治疗肝炎后肝硬化的方法。
第一步无菌条件下采用负收集法分离脐血干细胞,同时采用酶消化法分离脐带间充质干细胞。观察两种干细胞的形态,并通过流式细胞仪进行进一步鉴定。
第二步选择47例失代偿期肝炎后肝硬化患者,在抗病毒治疗的基础上,其中脐血干细胞治疗组(27例),将脐血干细胞通过肝固有动脉介入和静脉输注途径植入。脐带间充质干细胞治疗组(20例),采用同样方法植入。
观察干细胞植入前和植入后半个月、1个月、3个月及6个月时患者血清学指标改变,主要包括肝功能指标：血浆白蛋白水平(ALB)、总胆红素(TBIL)水平及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),血常规指标：血小板(PLT)、白细胞(WBC)及凝血功能指标：凝血酶原时间(PT),肿瘤标记物：甲胎蛋白(AFP)。并对患者治疗前及治疗后3个月B超结果进行比较,同时观察患者临床症状、体征(乏力、纳差、肝病面容、蜘蛛痣等)改善情况和术后不良反应。
采集的脐血量约为110ml(100-130ml),通过负收集法单份脐血可分离获得干细胞平均数为2.31×108。倒置显微镜下观察,细胞分布均匀,大小均匀,呈圆形,透亮,折光性强,细胞活性95%。流式细胞仪检测结果：CD34+细胞占0.23%,活率为72.71%。无细胞污染事件发生。
通过酶消化法,从脐带组织中成功获得间充质干细胞,细胞分离培养至贴壁生长至80-90%融合约需10-14天。后大约3-5天传代一次。倒置显微镜下观察,原代细胞呈扁平条索状。P1、P2、P3、P4代细胞形态观察：细胞形态较均一,折光度好。细胞膜表面有小的突起,胞核位于胞体的中央,为圆形或椭圆形,胞质丰富,呈成纤维样细胞形态,平行排列生长或涡旋状生长。
在脐血干细胞治疗组中我们发现,术前与术后3个月、6个月AST、 TBIL、CHE和ALB水平比较,差异均有统计学意义(P0.05)。白细胞计数在第3个月后显著增加(P0.05),第6个月出现下降。血小板计数无明显变化,但逐渐改善。AFP在第3个月较治疗前有明显差异(P0.05),第6个月出现下降。细胞植入后3个月左右行腹部超声检查,门静脉直径减小13例,增大12例,不变2例。脾脏厚度16例减小,11例增大。在治疗过程中无脏器衰竭及急性或慢性GVHD的病例。发热病例4例,皮疹3例。植入细胞半个月,患者的精神、饮食改善明显。腹胀、乏力不适好转。植入后6个月者腹腔积液减少率为81.48%(22/27),食欲、乏力好转率为88.89%(24/27),肝掌及蜘蛛痣减轻率为51.85%(14/27)。
脐带间充质治疗组,术前与术后ALB水平在第1个月即有显著差异(P0.05),持续到第6个月。术后3个月,6个月时AST、TBIL和PT水平较术前比较,差异均有统计学意义(P0.05)。白细胞及血小板计数无显著变化,但逐渐改善。AFP水平术后第1个月,第3个月较术前比较,有显著性差异(P0.05),第6个月下降,无显著性差异。患者细胞植入后3个月左右行腹部超声检查,门静脉直径减小7例,增大9例,不变4例。脾脏厚度11例减小,9例增大。在治疗过程中无脏器衰竭病例,无急性或慢性GVHD的病例。发热病例8例。植入细胞半个月后,腹胀、乏力不适逐渐缓解,食欲较输注前好转。植入后6个月,患者腹水减少率为80%(16/20),腹胀、乏力不适改善率90%(18/20),肝掌及蜘蛛痣减轻率为50%(10/20)。通过两种治疗方案对患者临床症状及体征、腹部B超结果(门静脉直径、腹水、脾脏厚度)有效率的分析,两种治疗方法无明显差异(P0.05)。
总之,脐血干细胞分离及脐带间充质干细胞分离培养方法安全、高效、稳定,两者对失代偿期肝炎肝硬化患者的肝功能恢复效果显著,且无明显差异。脐带间充质干细胞分离、培养过程时间长、容易污染、难度较大,且成本较高,而脐血干细胞临床应用时间长,分离方法操作简便、安全性较高,因此更适合于临床应用。
【学位授予单位】：河北北方学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：R575.2
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400-819-9993血清甲胎蛋白含量变化与重型肝炎预后的关系--《中国临床医学杂志》1998年01期
血清甲胎蛋白含量变化与重型肝炎预后的关系
【摘要】：本文对我院1986年～1995年收治的129例重型肝炎,根据血清甲胎蛋白(AFP)含量分组进行对比研究,探讨含量变化与重型肝炎预后的关系,结果升高组病死率为39％,正常组病死率为68％,P0.01。将血清AFP30～100μg/l,101～200μg/l,200μg/l,分别分为A、B、C三组,结果A组与B组,B组与C组比较,P均0.05,A组与C组比较,P0.05。生存组血清AFP平均峰值为250.4±27.5μg/l,而病死组平均峰值为180.2±37.2μg/l,P0.01。提示血清AFP含量变化对重型肝炎的预后估计,具有一定参考价值。
【作者单位】：
【分类号】：R575.1
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甲胎蛋白检测在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭预后判断中的意义
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value="目的：　　近年来，在传染性疾病中，我国流行最广泛、造成死亡人数最多的是慢性乙型病毒性肝炎。现在，HBV慢性感染者的人数约有9300万例，而慢性乙型肝炎患者的人数占1/5多，有2000万例左右。有15％~40％未经抗病毒治疗的患者将进展为终末期肝病，如肝硬化、肝衰竭及肝癌等。乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭占所有肝衰竭病人的80%~90%，病死率高达50%~80%，严重影响人们的健康水平，而目前治疗上对此疾病并无特效药物，预防该病的关键是早发现、早诊断、早治疗，为了更好检测慢加急肝衰竭患者病情变化，本研究对患者血清甲胎蛋白进行比较，通过对患者甲胎蛋白检测对比分析，观察AFP与患者预后间存在的变化关系，从而对慢加急性肝衰竭患者预后进行有效的判断，以便于达到早期预防、早期治疗的目的。　　方法：　　收集2014年1月~2014年10月在泰山医学院附属莱芜医院感染性疾病科住院诊治的乙肝导致慢加急性肝衰竭患者100例,并进行回顾性分析。根据患者治疗结果不同,将患者分为生存组和死亡组,每组各有50例患者。入院后每周对两组患者分别检测的血清甲胎蛋白,连续监测8周,并进行对比分析。通过分析在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭中,早期检测AFP指标与患者预后的关系,阐述早期检测甲胎蛋白在慢加急性肝衰竭中的临床意义。应用SPSS16.0统计软件对所得的数据进行统计分析,计量资料用均数、标准差(x±s)表示,两组之间率的比较采用χ2检验,适合正态分布的计量资料选用t检验,以P<0．05为有统计学意义,以阐明血清早期甲胎蛋白(AFP)检测与在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者预后的关系,并确定慢加急性肝衰竭患者早期检测甲胎蛋白的临床意义。　　结果：　　通过研究发现,生存组及死亡组患者在入院后的各项指标,在性别、年龄、谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、直接胆红素、凝血酶原活动度无明显差异,没有统计学意义；乙型肝炎病毒定量也无统计学差异（P值均大于0.05）。本研究中死亡组患者有3个并发症的患者有20例,而生存组患者并发症有3个的患者有10例,两者比较有明显差异。说明并发症多,预示患者预后不良。乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭死亡组患者血清AFP水平在入院1~8周保持在较低水平,且无明显变化,并且发现生存组患者血清 AFP水平从入院第1周即开始升高,且至入院第5周甲胎蛋白升高至最高值,从第1周115±28.7 ng/ml升高到208±45.4ng/ml,之后逐渐下降,至第8周（达到134±16.7 ng/ml）明显高于死亡组,差异有统计学（P<0.05）。按照临床表现的轻重不同,将乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的病程分为早、中、晚期后进行比较,生存组甲胎蛋白水平在早、中、晚期分别为123±23.5ng/ml、160±34.5 ng/ml、210±43.1 ng/ml高于死亡组的25.6±12.7 ng/ml、26．3±11.5 ng/ml、24.5±13.6 ng/ml差异有统计学意义（p<0.05）,而在生存组中,晚期患者的AFP高于早中期,差异有统计学意义。　　1.患者年龄、性别与乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭预后无相关性。　　2.入院时乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、凝血酶原活动度等对预测患者预后的影响判断不显著。　　3.乙型肝炎病毒虽然是乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的始发因素,但乙型肝炎病毒不是导致乙肝相关性肝衰竭的唯一因素,单纯抗 HBV-DNA治疗对提高乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的生存意义不大,HBV-DNA检测不能达到预测乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的目的。　　4.并发症的多少可做为乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的预后影响因素,但由于多个并发症发生在病程晚期,因而,并发症多少仅能做为晚期预后影响因素。　　5.对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者来说,早期甲胎蛋白水平检测与其预后有直接关系。甲胎蛋白水平较高,提示患者预后较好,反之将预示患者预后较差。　　结论：　　乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者早期甲胎蛋白水平能够预测患者预后。早期患者甲胎蛋白水平高且逐渐升高,预示患者预后较好。反之,预示患者预后差。单独甲胎蛋白水平就能预测乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的预后,且由于甲胎蛋白检测费用低,技术难度小,容易在各级医院推广。因此甲胎蛋白检测对判断乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭预后非常重要的临床意义。"/>
目的：　　近年来，在传染性疾病中，我国流行最广泛、造成死亡人数最多的是慢性乙型病毒性肝炎。现在，HBV慢性感染者的人数约有9300万例，而慢性乙型肝炎患者的人数占1/5多，有2000万例左右。有15％~40％未经抗病毒治疗的患者将进展为终末期肝病，如肝硬化、肝衰竭及肝癌等。乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭占所有肝衰竭病人的80%~90%，病死率高达50%~80%，严重影响人们的健康水平，而目前治疗上对此疾病并无特效药物，预防该病的关键是早发现、早诊断、早治疗，为了更好检测慢加急肝衰竭患者病情变化，本研究对患者血清甲胎蛋白进行比较，通过对患者甲胎蛋白检测对比分析，观察AFP与患者预后间存在的变化关系，从而对慢加急性肝衰竭患者预后进行有效的判断，以便于达到早期预防、早期治疗的目的。　　方法：　　收集2014年1月~2014年10月在泰山医学院附属莱芜医院感染性疾病科住院诊治的乙肝导致慢加急性肝衰竭患者100例,并进行回顾性分析。根据患者治疗结果不同,将患者分为生存组和死亡组,每组各有50例患者。入院后每周对两组患者分别检测的血清甲胎蛋白,连续监测8周,并进行对比分析。通过分析在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭中,早期检测AFP指标与患者预后的关系,阐述早期检测甲胎蛋白在慢加急性肝衰竭中的临床意义。应用SPSS16.0统计软件对所得的数据进行统计分析,计量资料用均数、标准差(x±s)表示,两组之间率的比较采用χ2检验,适合正态分布的计量资料选用t检验,以P<0．05为有统计学意义,以阐明血清早期甲胎蛋白(AFP)检测与在乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者预后的关系,并确定慢加急性肝衰竭患者早期检测甲胎蛋白的临床意义。　　结果：　　通过研究发现,生存组及死亡组患者在入院后的各项指标,在性别、年龄、谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、直接胆红素、凝血酶原活动度无明显差异,没有统计学意义；乙型肝炎病毒定量也无统计学差异（P值均大于0.05）。本研究中死亡组患者有3个并发症的患者有20例,而生存组患者并发症有3个的患者有10例,两者比较有明显差异。说明并发症多,预示患者预后不良。乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭死亡组患者血清AFP水平在入院1~8周保持在较低水平,且无明显变化,并且发现生存组患者血清 AFP水平从入院第1周即开始升高,且至入院第5周甲胎蛋白升高至最高值,从第1周115±28.7 ng/ml升高到208±45.4ng/ml,之后逐渐下降,至第8周（达到134±16.7 ng/ml）明显高于死亡组,差异有统计学（P<0.05）。按照临床表现的轻重不同,将乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的病程分为早、中、晚期后进行比较,生存组甲胎蛋白水平在早、中、晚期分别为123±23.5ng/ml、160±34.5 ng/ml、210±43.1 ng/ml高于死亡组的25.6±12.7 ng/ml、26．3±11.5 ng/ml、24.5±13.6 ng/ml差异有统计学意义（p<0.05）,而在生存组中,晚期患者的AFP高于早中期,差异有统计学意义。　　1.患者年龄、性别与乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭预后无相关性。　　2.入院时乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、凝血酶原活动度等对预测患者预后的影响判断不显著。　　3.乙型肝炎病毒虽然是乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的始发因素,但乙型肝炎病毒不是导致乙肝相关性肝衰竭的唯一因素,单纯抗 HBV-DNA治疗对提高乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者的生存意义不大,HBV-DNA检测不能达到预测乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的目的。　　4.并发症的多少可做为乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的预后影响因素,但由于多个并发症发生在病程晚期,因而,并发症多少仅能做为晚期预后影响因素。　　5.对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者来说,早期甲胎蛋白水平检测与其预后有直接关系。甲胎蛋白水平较高,提示患者预后较好,反之将预示患者预后较差。　　结论：　　乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者早期甲胎蛋白水平能够预测患者预后。早期患者甲胎蛋白水平高且逐渐升高,预示患者预后较好。反之,预示患者预后差。单独甲胎蛋白水平就能预测乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭的预后,且由于甲胎蛋白检测费用低,技术难度小,容易在各级医院推广。因此甲胎蛋白检测对判断乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭预后非常重要的临床意义。
摘要： 目的：　　近年来，在传染性疾病中，我国流行最广泛、造成死亡人数最多的是慢性乙型病毒性肝炎。现在，HBV慢性感染者的人数约有9300万例，而慢性乙型肝炎患者的人数占1/5多，有2000万例左右。有15％~40％未经抗病毒治疗的患者将进展为终末期肝病，如肝硬化、肝衰竭及肝癌等。乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭占所有肝衰竭病人的80%~90%，病死率高达50...&&
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