水果简述蔬菜在烹饪中的应用用特点

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应用GB6标准检测水果、蔬菜中的维生素C含量

安捷伦1100高效液相色谱仪,配紫外检测器;密理博超纯水机;超声波消洗器;离心机

甲醇(色谱纯)、磷酸二氢钾、十六烷基三甲基溴化铵均为分析级;试验用水为超纯水

甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98

1.3标样检测的色素的色谱图

按设定好的仪器条件,对标准样品进行了汾析测定其L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸混合标准溶液(25.0ug/mL)分离的色谱图如下:


对比这三张谱图可以发现:L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸从一开始就未实现基线分离,且随着时间的延长L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸走着走着就快要变成只有一个峰了啊,怎么回事

尝试着更换流动相試试:

将标准中的流动相:甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L,用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98更换成甲醇∶0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5,以利于保护该色谱柱)=2:98其余条件不变。

L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸混合标准溶液(25.0ug/mL)分离的色谱图如下:


可以看出随着时间的延长L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸二者还是可以很好的实现基线分离。


系列工作曲线点的重叠色谱图:从这张图可以看出它们的出峰时间是比较稳定的且不會向使用GB6所述的流动相那样,L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸二者走着走着峰就重在一起了因此使用流动相:0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5)来分析维生素C比较理想。

GB6标准所述的流动相中含有十六烷基三甲基溴化铵其是一种表面活性剂,只要轻微的晃动就极易产生小汽泡的所以难免造成L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸出峰时间的飘移而产生的不稳定性。

3样品测定及加标回收试验:

依GB6取某果汁饮料样品做两个浓度水平的标准加入回收實验,称取匀浆好后的样品2克分别加入L(+)-抗坏血酸0.02mL50ug/mL、0.1mL50ug/mL;D(+)-抗坏血酸0.02mL50ug/mL、0.1mL50ug/mL均按本方法做3次平行测定,L(+)-抗坏血酸平均回收率为86.3%D(+)-抗坏血酸平均回收率为85.4%。结果见表1.


综合上述:要使L(+)-抗坏血酸和D(+)-抗坏血酸得以基线分离关键是:将标准中的流动相:甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L,用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98更换成甲醇∶0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5,以利于保护该色谱柱)=2:98其余条件不变。

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