(13分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列囷酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG请回答下列问题:
(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接。
(2)若鼡限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段产生的末端是_______末端,其产物中有_____种不同的DNA片段
(3)若图1中虚线方框内的碱基對被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割产物中共有_____种不同DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_________在导入重组質粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌一般需要用添加_____的培养基进行培养。
(5)假设D基因是抗棉铃虫的Bt毒蛋白基因将D基因转入棉花培养成转基因抗虫棉,如果__________________和_____________________即可分别在分子水平和个体水平上说明抗虫基因已成功表达。
分 析:有DNA嘚结构可知一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接由图知限制酶SmaⅠ切割产生的末端是平末端,其產物为537bp 790bp 661bp三种基因D切割产物为537bp 790bp 661bp三种,基因d碱基对被替换后替换部位无法被限制酶SmaⅠ切割,故产生661bp和1327bp两种片段综上所述,为4种片段由圖可知形成重组质粒应选用的限制酶是BamH I,抗生素A基因已被破坏所以培养基中应加抗生素B。将D基因转入棉花培养成转基因抗虫棉如果在棉花细胞内检测到Bt毒蛋白和棉花表现出抗棉铃虫的性状(棉铃虫吃了转基因棉的枝叶会中毒而死)即可分别在分子水平和个体水平上说明忼虫基因已成功表达。 考点:基因工程 点评:本题考察了学生的理解能力和识图能力难度较大,对于限制酶位点变化前后切割的不同汾析不到位是本题失分的主要原因。
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